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組織研磨機對提取動物關節(jié)軟骨組織總RNA

閱讀:393      發(fā)布時間:2023-3-13
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實驗目的
研磨破碎軟骨組織(大鼠膝關節(jié)軟骨)模式,提取其總RNA自動化。

實驗原理
充分磨碎軟骨樣品(大鼠膝關節(jié)軟骨),再用相關試劑提取其總RNA高品質。

實驗材料和器具
樣品:大鼠膝關節(jié)軟骨
儀器:多樣品組織研磨儀
耗材:研磨罐不折不扣,研磨珠
試劑:液氮若干

實驗步驟
1.研磨軟骨組織
1.1 取適量大鼠膝關節(jié)軟骨組織,剪切成約1立方厘米小塊資源優勢;
1.2 將小塊軟骨組織置于液氮中2分鐘或放入-80度冰箱冷凍30分鐘高效利用;
1.3 將樣品和研磨珠放入研磨罐中,蓋好蓋子估算;
1.4 將裝好樣品及鋼珠的研磨管講理論,放入已經(jīng)在-20度冰箱預冷好的適配器中,加入變性液不要畏懼,β-巰基乙醇服務為一體;
1.5 將適配器放入凈信研磨儀中,在14單位頻振條件下逐漸顯現,研磨1min全會精神,可得到勻漿狀的軟骨組織系統穩定性;
2.總RNA提取
2.1 冰水浴下,加酸性水飽和酚集中展示,搖勻實力增強,加醋酸鈉,氯fang探索創新、異戊醇混合液帶來全新智能,冰水浴上15min;
2.2 4℃下全面闡釋,離心非常激烈,取上清液競爭力所在,加氯fang引人註目、異戊醇混合液,離心取上清溝通機製,加異丙醇好宣講,-20℃下沉淀,離心領先水平,得到凝膠狀RNA和蛋白多糖混合沉淀,加無RNA酶水,溶解得膠狀溶液戰略布局;
2.3 取膠狀溶液用plant RNAout試劑盒的RNA提取步驟得到總RNA沉淀事關全面,取沉淀,乙醇洗滌后用無RNA酶水溶解沉淀狀態,即得關節(jié)軟骨組織總RNA溶液技術節能。


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