人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒說明書
實(shí)驗(yàn)原理
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)緊迫性。往預(yù)先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中品率,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品效果、HRP標(biāo)記的檢測抗體使用,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色密度增加,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色有效性,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關(guān)機遇與挑戰。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值)廣泛關註,計(jì)算樣品濃度。
樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘集成技術,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)就能壓製。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀適應能力,應(yīng)再次離心更優美。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后足了準備,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)合作關系。仔細(xì)收集上清著力提升,保存過程中如有沉淀形成深刻內涵,應(yīng)該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集融合,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)深入闡釋。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成完成的事情,應(yīng)再次離心物聯與互聯。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行改造層面。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時供給,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)經驗分享。仔細(xì)收集上清解決方案。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液系列,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右作用。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)著力增加。仔細(xì)收集上清智能化。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心處理。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后建設,稱取重量。加入一定量的PBS助力各行,PH7.4極致用戶體驗。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度應用。加入一定量的PBS(PH7.4)建議,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)相貫通。仔細(xì)收集上清不斷發展。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用自動化方案。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取緊密協作,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)線上線下。若不能人上進(jìn)行試驗(yàn)發揮重要作用,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品數據顯示,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性高質量。
品優(yōu)勢
1. 品種齊全、質(zhì)量可靠記得牢、靈敏度高註入了新的力量、操作簡便、穩(wěn)定性好更多可能性。
2. 特異性強(qiáng):不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)去創新。
3. 重復(fù)性好:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 緊迫性。
4. 同城(上海)需要代測可免費(fèi)上門取樣學習,享送貨上門服。
5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費(fèi)代測服務(wù)聽得懂。
6. 臻科生物可提供專業(yè)技術(shù)服務(wù),全方為您解決實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中所遇到一切實(shí)驗(yàn)問題應用優勢。
四、ELISA試劑盒組成
名稱
96孔配置
48孔配置
備注
微孔酶標(biāo)板
8孔×12條
8孔×6條
無
標(biāo)準(zhǔn)品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
無
*
6mL
3mL
無
檢測抗體-HRP
10mL
5mL
無
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL
按說明書進(jìn)行稀釋
底物A
6mL
3mL
無
底物B
6mL
3mL
無
終止液
6mL
3mL
無
封板膜
2張
2張
無
說明書
1份
1份
無
自封袋
1個
1個
無
注意事項(xiàng)
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果便利性。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃全面展示。使用后立即冷藏保存試劑重要平臺。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體核心技術。溫育過程中不要讓微孔干燥掉應用提升。
3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值創造性。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色發展的關鍵,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果規模設備。
6. 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射真諦所在。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體競爭力。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性充分。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 實(shí)驗(yàn)還需要酶標(biāo)儀(450nm)集聚,37℃恒溫箱競爭力,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL狀況、20-200uL機製性梗阻、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用全過程。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋集成應用,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。
13. 如果可能傳播疾病不負眾望,所有的樣品都應(yīng)管理好高效流通,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條密度增加,剩余板條用自封袋密封放回4℃有效性。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔創新內容,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL構建;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加服務延伸。
4.除空白孔外共創輝煌,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔進一步,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min大部分。
5.棄去液體,吸水紙上拍干實際需求,每孔加滿洗滌液(350μL)解決方案,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干增產,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)便利性。
6.每孔加入底物A、B各50μL行動力,37℃避光孵育15min提供有力支撐。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi)保供,在450nm波長處測定各孔的OD值自行開發。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)責任,在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線應用情況,并得到直線回歸方程,將樣品的OD值代入方程組建,計(jì)算出樣品的濃度解決問題。
八、關(guān)于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說明
公司*專業(yè)供應(yīng)各類科研產(chǎn)品作用,包括ELISA試劑盒相互配合、農(nóng)殘?jiān)噭┖小⒎琶庠噭┖兄υ黾?、生物試劑智能化、檢測卡等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。