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大鼠腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

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  大鼠腦源性神經(jīng)生長因子(BDNF)檢測試劑盒說明書
 
  實(shí)驗(yàn)原理
 
  是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)經驗分享。往預(yù)先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中去創新,依次加入標(biāo)本應用、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體生產效率,經(jīng)過溫育并*洗滌使命責任。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色使用,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色合規意識。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值)有效性,計(jì)算樣品濃度創新內容。
 
  樣本處理要求
 
  1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)廣泛關註。仔細(xì)收集上清善於監督,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心就能壓製。
 
  2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑至關重要,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)效果。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成足了準備,應(yīng)該再次離心合作關系。
 
  3.尿液:用無菌管收集著力提升,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清傳遞,保存過程中如有沉淀形成融合,應(yīng)再次離心。胸腹水相關性、腦脊液參照實(shí)行穩中求進。
 
  4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集最深厚的底氣。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)協同控製。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)品質,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液利用好,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融解決問題,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份系列。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清相互配合。保存過程中如有沉淀形成慢體驗,應(yīng)再次離心。
 
  5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后智能化,稱取重量科技實力。加入一定量的PBS,PH7.4合作。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆貌鷻C。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)極致用戶體驗,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分提供有力支撐。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清建議。分裝后一份待檢測品率,其余冷凍備用。
 
  6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取不斷發展,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行積極影響,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能人上進(jìn)行試驗(yàn)緊密協作,可將標(biāo)本放于-20℃保存越來越重要,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
 
  7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
 
  品優(yōu)勢
 
  1.  品種齊全醒悟、質(zhì)量可靠數據顯示、靈敏度高、操作簡便技術先進、穩(wěn)定性好更多的合作機會。
 
  2. 特異性強(qiáng):不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
 
  3. 重復(fù)性好:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% 認為,板間變異系數(shù)小于15% 服務好。
 
  4. 同城(上海)需要代測可免費(fèi)上門取樣,享送貨上門服反應能力。
 
  5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費(fèi)代測服務(wù)共謀發展。
 
  6. 臻科生物可提供專業(yè)技術(shù)服務(wù),全方為您解決實(shí)驗(yàn)進(jìn)程中所遇到一切實(shí)驗(yàn)問題。
 
  四有所提升、ELISA試劑盒組成
 
  名稱
 
  96孔配置
 
  48孔配置
 
  備注
 
  微孔酶標(biāo)板
 
  8孔×12條
 
  8孔×6條
 
  無
 
  標(biāo)準(zhǔn)品
 
  0.3mL*6管
 
  0.3mL*6管
 
  無
 
  *
 
  6mL
 
  3mL
 
  無
 
  檢測抗體-HRP
 
  10mL
 
  5mL
 
  無
 
  20×洗滌緩沖液
 
  25mL
 
  15mL
 
  按說明書進(jìn)行稀釋
 
  底物A
 
  6mL
 
  3mL
 
  無
 
  底物B
 
  6mL
 
  3mL
 
  無
 
  終止液
 
  6mL
 
  3mL
 
  無
 
  封板膜
 
  2張
 
  2張
 
  無
 
  說明書
 
  1份
 
  1份
 
  無
 
  自封袋
 
  1個
 
  1個
 
  無
 
  注意事項(xiàng)
 
  1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果聽得進。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑先進水平。
 
  2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果便利性。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉重要平臺。
 
  3. 消除板底殘留的液體和手指印深刻認識,否則影響OD值。
 
  4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色應用提升,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用主動性。
 
  5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
 
  6. 在儲存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射發展的關鍵。
 
  7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上道路。
 
  8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性真諦所在。
 
  9. 不能使用過期產(chǎn)品指導。
 
  10. 實(shí)驗(yàn)還需要酶標(biāo)儀(450nm),37℃恒溫箱充分,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL進一步完善、2-20uL、20-200uL競爭力、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水調整推進。
 
  11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
 
  12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋機製性梗阻,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水機製。
 
  13. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置堅持先行。
 
  操作步驟
 
  1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條產業,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
 
  2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔情況較常見,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
 
  3.樣本孔中加入待測樣本50μL主要抓手;空白孔不加體製。
 
  4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL創新科技,用封板膜封住反應(yīng)孔服務延伸,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
 
  5.棄去液體具有重要意義,吸水紙上拍干進一步,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min強大的功能,甩去洗滌液實際需求,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)優勢。
 
  6.每孔加入底物A善謀新篇、B各50μL,37℃避光孵育15min便利性。
 
  7.每孔加入終止液50μL方法,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值提供有力支撐。
 
  實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算
 
  以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)切實把製度,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線自行開發,并得到直線回歸方程進行部署,將樣品的OD值代入方程,計(jì)算出樣品的濃度品質。
 
  八利用好、關(guān)于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說明
 
  公司*專業(yè)供應(yīng)各類科研產(chǎn)品,包括ELISA試劑盒解決問題、農(nóng)殘?jiān)噭┖邢盗?、放免試劑盒、生物試劑的有效手段、檢測卡等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品統籌推進。

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