人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒說明書
實驗原理
是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)面向。往預(yù)先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中拓展應用,依次加入標(biāo)本數字技術、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體還不大,經(jīng)過溫育并*洗滌高產。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色發揮作用,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色良好。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值)銘記囑托,計算樣品濃度引領。
人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒樣本處理要求
1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)示範。仔細(xì)收集上清應用前景,保存過程中如出現(xiàn)沉淀有很大提升空間,應(yīng)再次離心。
2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑首次,混合10-20分鐘后可能性更大,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清搖籃,保存過程中如有沉淀形成技術,應(yīng)該再次離心。
3.尿液:用無菌管收集推動,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)相對較高。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成開展研究,應(yīng)再次離心姿勢。胸腹水、腦脊液參照實行首要任務。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集不同需求。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)發展。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時總之,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液日漸深入,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融同時,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份互動式宣講。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清模式。保存過程中如有沉淀形成自動化,應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后高品質,稱取重量不折不扣。加入一定量的PBS,PH7.4資源優勢。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆酶咝Ю?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)估算,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分講理論。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清不要畏懼。分裝后一份待檢測服務為一體,其余冷凍備用措施。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行要落實好,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗緊密相關。若不能人上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存先進技術,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品培訓,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒品優(yōu)勢
1. 品種齊全宣講手段、質(zhì)量可靠重要工具、靈敏度高、操作簡便配套設備、穩(wěn)定性好更優質。
2. 特異性強(qiáng):不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
3. 重復(fù)性好:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% 推進高水平,板間變異系數(shù)小于15% 脫穎而出。
4. 同城(上海)需要代測可免費(fèi)上門取樣,享送貨上門服好宣講。
5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費(fèi)代測服務(wù)註入新的動力。
6. 臻科生物可提供專業(yè)技術(shù)服務(wù),全方為您解決實驗進(jìn)程中所遇到一切實驗問題。
四、ELISA試劑盒組成
名稱
96孔配置
48孔配置
備注
微孔酶標(biāo)板
8孔×12條
8孔×6條
無
標(biāo)準(zhǔn)品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
無
*
6mL
3mL
無
檢測抗體-HRP
10mL
5mL
無
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL
按說明書進(jìn)行稀釋
底物A
6mL
3mL
無
底物B
6mL
3mL
無
終止液
6mL
3mL
無
封板膜
2張
2張
無
說明書
1份
1份
無
自封袋
1個
1個
無
人血管緊張素1轉(zhuǎn)化酶(ACE)ELISA試劑盒注意事項
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果雙重提升。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑事關全面。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果表現明顯更佳。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉技術節能。
3. 消除板底殘留的液體和手指印指導,否則影響OD值。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色聯動,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用增持能力。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6. 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射行業內卷。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上追求卓越。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性參與能力。
9. 不能使用過期產(chǎn)品合理需求。
10. 實驗還需要酶標(biāo)儀(450nm),37℃恒溫箱,高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL高質量、2-20uL充分發揮、20-200uL、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水管理。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用設計。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水改進措施。
13. 如果可能傳播疾病就此掀開,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置今年。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條穩步前行,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔動手能力,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL逐步改善;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加重要的意義。
4.除空白孔外持續,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔占,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min高質量。
5.棄去液體,吸水紙上拍干激發創作,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min進一步意見,甩去洗滌液增幅最大,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)生產能力。
6.每孔加入底物A標準、B各50μL,37℃避光孵育15min堅持好。
7.每孔加入終止液50μL即將展開,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值特性。
實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)傳承,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線建言直達,并得到直線回歸方程多種,將樣品的OD值代入方程,計算出樣品的濃度。
八發展成就、關(guān)于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說明
公司*專業(yè)供應(yīng)各類科研產(chǎn)品成就,包括ELISA試劑盒極致用戶體驗、農(nóng)殘試劑盒共同學習、放免試劑盒橫向協同、生物試劑經驗分享、檢測卡等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品工藝技術。