兔α2巨球蛋白(A2M)定量elisa試劑盒說明書
實驗原理
兔α2巨球蛋白(A2M)定量elisa試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)蓬勃發展。往預(yù)先包被兔α2巨球蛋白(A2M)捕獲抗體的包被微孔中提升行動，依次加入標(biāo)本溝通協調、標(biāo)準(zhǔn)品相關性、HRP標(biāo)記的檢測抗體完成的事情，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色穩定，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色改造層面，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的兔α2巨球蛋白(A2M)呈正相關(guān)優勢與挑戰。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD值)經驗分享，計算樣品濃度。
樣本處理要求
1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘趨勢，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)有力扭轉。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀一站式服務，應(yīng)再次離心廣度和深度。
2.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后引領作用，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)加強宣傳。仔細(xì)收集上清臺上與臺下，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心技術發展。
3.尿液：用無菌管收集集聚效應，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清重要手段，保存過程中如有沉淀形成互動講，應(yīng)再次離心。胸腹水像一棵樹、腦脊液參照實行過程中。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集能運用。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)重要部署。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時工具，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液智慧與合力，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融重要的角色，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份數據顯示。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清也逐步提升。保存過程中如有沉淀形成記得牢，應(yīng)再次離心。
5.組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后重要的作用，稱取重量更多可能性。加入一定量的PBS，PH7.4足夠的實力。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆镁o迫性。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)更適合，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分高效。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清要素配置改革。分裝后一份待檢測體系，其余冷凍備用。
6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取帶動產業發展，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行責任製，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能人上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存規則製定，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7.不能檢測含NaN3的樣品擴大，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
兔α2巨球蛋白(A2M)定量elisa試劑盒品優(yōu)勢
1. 品種齊全發揮效力、質(zhì)量可靠、靈敏度高明顯、操作簡便安全鏈、穩(wěn)定性好。
2. 特異性強(qiáng)：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)創新為先。
3. 重復(fù)性好：板內(nèi)變異系數(shù)小于10% 真正做到，板間變異系數(shù)小于15% 。
4. 同城(上海)需要代測可免費上門取樣創新延展，享送貨上門服強化意識。
5. 根據(jù)客戶需求專業(yè)定制elisa試劑盒并提供免費代測服務(wù)。
6. 臻科生物可提供專業(yè)技術(shù)服務(wù),全方為您解決實驗進(jìn)程中所遇到一切實驗問題基本情況。
四機製、ELISA試劑盒組成
名稱
96孔配置
48孔配置
備注
微孔酶標(biāo)板
8孔×12條
8孔×6條
無
標(biāo)準(zhǔn)品
0.3mL*6管
0.3mL*6管
無
*
6mL
3mL
無
檢測抗體-HRP
10mL
5mL
無
20×洗滌緩沖液
25mL
15mL
按說明書進(jìn)行稀釋
底物A
6mL
3mL
無
底物B
6mL
3mL
無
終止液
6mL
3mL
無
封板膜
2張
2張
無
說明書
1份
1份
無
自封袋
1個
1個
無
兔α2巨球蛋白(A2M)定量elisa試劑盒注意事項
1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃集成應用。使用后立即冷藏保存試劑探討。
2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體高效流通。溫育過程中不要讓微孔干燥掉調解製度。
3. 消除板底殘留的液體和手指印，否則影響OD值功能。
4. 底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色應用的因素之一，已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。
5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果預期。
6. 在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射敢於監督。
7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體結構。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性更合理。
9. 不能使用過期產(chǎn)品。
10. 實驗還需要酶標(biāo)儀(450nm)更優美，37℃恒溫箱各方面，高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL成效與經驗、20-200uL適應性、200-1000uL以及蒸餾水或去離子水。
11. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。
12. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋重要作用，即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水等地。
13. 如果可能傳播疾病，所有的樣品都應(yīng)管理好尤為突出，按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置規定。
操作步驟
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃空間載體。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔高質量，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL重要組成部分；空白孔不加流程。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL特點，用封板膜封住反應(yīng)孔深刻變革，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體和諧共生，吸水紙上拍干質生產力，每孔加滿洗滌液(350μL)，靜置1min技術交流，甩去洗滌液處理，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)在此基礎上。
6.每孔加入底物A助力各行、B各50μL，37℃避光孵育15min自主研發。
7.每孔加入終止液50μL確定性，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值損耗。
實驗結(jié)果計算
以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)講故事，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線性能穩定，并得到直線回歸方程全面革新，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度情況正常。
八行業分類、關(guān)于兔α2巨球蛋白(A2M)定量ELISA試劑盒的特別說明
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