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384次植物激素脫落酸(ABA)elisa試劑盒使用說明書
產(chǎn)品名:植物激素脫落酸(ABA)elisa試劑盒
Elisa kit規(guī)格:48孔配置/96孔配置
標準品稀釋液:1.5ml×1瓶
酶標試劑:3 ml×1瓶(48)/6 ml×1瓶(96)
【植物激素脫落酸(ABA)試劑盒】本試劑僅供研究使用
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中植物激素脫落酸(ABA)水平成就。用純化的植物激素脫落酸(ABA)抗體包被微孔板,制成固相抗體開展面對面,往包被單抗的微孔中依次加入激素脫落酸(ABA)系統,再與HRP標記的激素脫落酸(ABA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物進一步提升,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色空間廣闊。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色不折不扣。顏色的深淺和樣品中的激素脫落酸(ABA)呈正相關(guān)支撐能力。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中植物激素脫落酸(ABA)濃度高效利用。
試劑盒組成:
封板膜:2片(48)/2片(96)
說明書:1份
密封袋:1個
標準品: 2700ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶標包被板: 1×48 1×96 2-8℃保存
樣品稀釋液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑A液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
顯色劑B液: 3ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
終止液: 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
濃縮洗滌液:(20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
目的:本試劑盒用于測定植物血清特征更加明顯,血漿及相關(guān)液體樣本中激素脫落酸(ABA)的含量。
保存條件及有效期:
試劑盒保存:2-8℃| 有效期:6個月
計算:
以標準物的濃度為橫坐標講理論,OD值為縱坐標的可能性,在坐標紙上繪出標準曲線不要畏懼,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù)問題;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式逐漸顯現,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度系統穩定性,再乘以稀釋倍數(shù)拓展基地,即為樣品的實際濃度。
【植物激素脫落酸(ABA)試劑盒】樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘實力增強,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)體系流動性。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀帶來全新智能,應(yīng)再次離心實現了超越。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后去完善,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)創新能力。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成範圍,應(yīng)該再次離心求得平衡。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)註入新的動力。仔細收集上清領先水平,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心雙重提升。胸腹水戰略布局、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時表現明顯更佳,用無菌管收集狀態。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清指導。檢測細胞內(nèi)的成份時廣泛認同,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右流動性。通過反復(fù)凍融鍛造,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)持續創新。仔細收集上清改善。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標本:切割標本后信息化,稱取重量形勢。加入一定量的PBS,PH7.4取得明顯成效。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆眉s定管轄。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)創新的技術,用手工或勻漿器將標本勻漿充分發揮。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清就此掀開。分裝后一份待檢測長足發展,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取不斷豐富,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗組建。若不能馬上進行試驗各有優勢,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品重要的意義,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性持續。
植物激素脫落酸(ABA)試劑盒操作步驟:
標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設(shè)標準品孔10孔,在再獲、第二孔中分別加標準品100μl產品和服務,然后在、第二孔中加標準品稀釋液50μl體驗區,混勻增多;然后從孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔有望,再在第三進一步推進、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻方案;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉應用的選擇,再各取50μl分別加到第五、第六孔中左右,再在第五背景下、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻可靠保障;混勻后從第五自然條件、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七將進一步、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl充分發揮,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九成就、第十孔中重要方式,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉系統。(稀釋后各孔加樣量都為50μl非常重要,濃度分別為150μg/L,100μg/L 快速融入,50μg/L認為,25μg/L,12.5μg/L)增強。
加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑重要意義,其余各步操作相同)、待測樣品孔更加廣闊。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl規劃,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部可以使用,盡量不觸及孔壁進入當下,輕輕晃動混勻。
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘效高化。
配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用新體系。
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體創造,甩干不難發現,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去全技術方案,如此重復(fù)5次分享,拍干。
加酶:每孔加入酶標試劑50μl信息化,空白孔除外方式之一。
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5新型儲能。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl創新能力,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻範圍,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl求得平衡,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)紮實做。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)至關重要。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行提供深度撮合服務。
注意事項:
試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完技術發展,板條應(yīng)裝入密封袋中保存集聚效應。
濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶重要手段,洗滌時不影響結(jié)果互動講。
各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性像一棵樹,以避免試驗誤差過程中。一次加樣時間建議控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多能運用,*使用排槍加樣達到。
請每次測定的同時做標準曲線,建議做復(fù)孔工具。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔孔的OD值)智慧與合力,請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)重要的角色。
封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染向好態勢。
底物請避光保存平臺建設。
嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
所有樣品貢獻力量,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理使用。
本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異發行速度,以英文說明書為準更加堅強。
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