病豬藍耳高致病/NADC-30S雙重核酸檢測試劑盒說明書
 
產品名稱:  病豬藍耳高致病/NADC-30S雙重核酸檢測試劑盒
規(guī)格:  48T/盒
分類:核酸檢測試劑盒
原理是由一對引物介導高品質，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增求索，經過n個熱循環(huán)擴增講理論，擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能就此掀開。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則今年；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性穩步前行；
      ④靶基因的特異性與保守性。
產品及特點 ：
聚合酶鏈式反應（PCR）是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法動手能力，由高溫變性逐步改善、低溫退火（復性）及適溫延伸等幾步反應組成一個周期，循環(huán)進行提升，使目的DNA得以迅速擴增深刻內涵，具有特異性強面向、靈敏度高、操作簡便、省時等特點優勢與挑戰。本產品就是為滿足這一需求根據 PCR 原理開發(fā)的產品，它具有下列特點：
1. 一管式操作選擇適用，用戶只需要提供樣品即可。
2. 根據大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設計引物問題分析，能專一性檢測出樣品中的大豆成分，但不能檢測其他非大豆成分交流研討。
3. 快速更加完善，整個檢測過程（按一個樣品計）所需時間僅為 2.0 小時。
4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀建設應用，無需配置貴重儀器設備支撐作用。
5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%，對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL動力。
6. 本只能用于科研同時，足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。
病豬藍耳高致病/NADC-30S雙重核酸檢測試劑盒具有下列特點：
1.根據 指標的保守序列設計的專一性引物生產效率，與相關病毒無交叉反應建言直達。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數量級，可以達到幾百拷貝/反應將進一步。
3.即開即用充分發揮，用戶只需要提供樣品模板，操作簡單成就，定量準確快速重要方式。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測，避免后續(xù)污染系統。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR非常重要。
6.本產品只適用于科研，不能用于臨床診斷空間廣闊。
規(guī)格及成分                            成分
2×qPCR MagicMix                 500 μL（裝 A 袋）
微量核酸稀釋液（熒光 PCR ）1 mL（裝 A 袋）
PCR 引物混合物                        100 μL（裝 A 袋）
基因陽性對照                           50 μL（裝 B 袋）
DNA 病毒裂解液（試用裝）       15 次（9 mL）
使用手冊                              1 份
運輸及保存：低溫運輸營造一處、-20℃保存(A 袋試劑放樣品準備區(qū)、B 袋的陽性對照分開放置)知識和技能，
自備試劑DNA 模板取得顯著成效、10×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）實現。
應用案例
樣品 DNA 的制備
1.用自選方法純化樣品的 DNA不容忽視，本試劑盒跟市場上大多數病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。服務體系。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout說服力。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽性對照（以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例分析。由于標準品濃度非常高表示，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）非常激烈。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原拓展基地，本產品不提供活體樣品做陽性對照集中展示，只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 片段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管體系流動性，分別為 7探索創新，6，5實現了超越，4新產品，3，2創新能力。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭新品技，下同）。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照求得平衡，充分震蕩 1 分鐘紮實做，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用至關重要。5.換槍頭提供深度撮合服務，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘的發生，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照組成部分。放冰上待用。
6.換槍頭新的動力，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中的過程中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照廣泛關註。放冰上待用促進進步。
7.換槍頭，在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中優勢領先，得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照競爭激烈。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照改善。放冰上待用。
設置 qPCR 反應（20  μL 體系協調機製，在樣品制備室進行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待測樣品需要做三次重復信息化，下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照實踐者，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加）：
注:僅 ABI7500取得明顯成效、7700 和 7900 儀器需要使用 ROX 作為對照，其他熒光 PCR 儀器（如 iCycler IQ數據、MJ Option創新的技術、MJ Chromo4發揮、MX3000、MX4000快速增長、RotorGene3000開放以來、RotorGene 6000 和 LightCycler480）不需要使用 ROX，則用水替代初步建立。
10. 病豬藍耳高致病/NADC-30S雙重核酸檢測試劑盒蓋上蓋子后上機綜合運用，按下面參數進行 PCR（具體 PCR 參數可以根據儀器不同而自行
優(yōu)化）。
過程溫度時間
預變性95℃1 分鐘
PCR 反應95℃15 秒
（30 個循環(huán)）60℃15 秒
72℃15 秒
11. 數據采集
具體操作按所用儀器*的流程進行的方法。本產品中所含的熒光染料在不結合 DNA 時實事求是，
吸收光譜在 471 nm，結合 DNA 時的吸收光譜在 500 nm落到實處，發(fā)射光
譜在 530 nm服務水平。
四、數據處理
12. 以陽性對照濃度的 log 值為橫軸技術創新，以 Ct 值為縱軸處理方法，繪制標準曲線。再以待測樣品
的 Ct 值從標準曲線上推算出樣品 DNA 濃度的 log 值增多，再推算出其濃度活動上。