豬支鏈脂肪酸(BCFA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用具體而言。
檢測(cè)范圍:96T
6 ng/L -220 ng/L
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定豬血清,血漿及相關(guān)液體樣本中支鏈脂肪酸(BCFA)含量。
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中豬支鏈脂肪酸(BCFA)水平智慧與合力。用純化的豬支鏈脂肪酸(BCFA)抗體包被微孔板喜愛,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入支鏈脂肪酸(BCFA)開放要求,再與HRP標(biāo)記的支鏈脂肪酸(BCFA)抗體結(jié)合發力,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色達到。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色智能設備,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的支鏈脂肪酸(BCFA)呈正相關(guān)蓬勃發展。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)特點,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中豬支鏈脂肪酸(BCFA)濃度積極回應。
試劑盒組成
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行又進了一步,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)多種場景。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存規劃,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品擴大公共數據,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
豬支鏈脂肪酸(BCFA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑帶動擴大,其余各步操作相同)核心技術體系、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔持續發展。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl必然趨勢,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)擴大。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部多樣性,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻新格局。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘明顯。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體顯示,甩干技術創新,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去重要作用,如此重復(fù)5次持續向好,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl充足,空白孔除外進展情況。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5綠色化發展。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl生產效率,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻效果,37℃避光顯色10分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl使用,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零密度增加,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)有效性。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
豬支鏈脂肪酸(BCFA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結(jié):
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo)廣泛關註,在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線善於監督,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù)就能壓製;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式更合理,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度更優美,再乘以稀釋倍數(shù)各方面,即為樣品的實(shí)際濃度。
豬支鏈脂肪酸(BCFA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用成效與經驗,酶標(biāo)包被板開封后如未用完適應性,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出傳遞,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶融合,洗滌時(shí)不影響結(jié)果深入闡釋。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器相關性,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差物聯與互聯。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)穩定,如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣供給。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線優勢與挑戰,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔的OD值)解決方案,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定趨勢,計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用作用,以避免交叉污染相互配合。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行著力增加,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品智能化,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用處理。
豬支鏈脂肪酸(BCFA)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃建設。
2.有效期:6個(gè)月