綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
本試劑盒僅供研究使用大大縮短。
96T
使用目的:
本試劑盒用于測定綿羊血清、血漿及相關液體樣本中產氣莢膜梭菌D型(CP-D)的表達良好。
實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)表達逐步顯現。用純化的綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)抗體包被微孔板,制成固相抗體引領,可與樣品中產氣莢膜梭菌D型(CP-D)相結合自動化裝置,經(jīng)洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的產氣莢膜梭菌D型(CP-D)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物應用前景,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色開展攻關合作。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成終的黃色預下達。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較統籌推進,從而判定標本中綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)的存在與否提升。
試劑盒組成
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行的必然要求,提取后應盡快進行實驗研究成果。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存完善好,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品大面積,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
1.編號:將樣品對應微孔按序編號問題分析,每板應設陰性對照2孔培養、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑更加完善,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰形式、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl支撐作用。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl日漸深入,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部同時,盡量不觸及孔壁互動式宣講,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜自動化,棄去液體提升,甩干,每孔加滿洗滌液落地生根,靜置30秒后棄去的特點,如此重復5次,拍干有效保障。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl大數據,空白孔除外。
7.溫育:操作同3講實踐。
8.洗滌:操作同5數字技術。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl市場開拓,輕輕震蕩混勻措施,37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)新模式。
11.測定:以空白空調零實現,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行組織了。
綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作程序總結:
計算和結果判定:
試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為產氣莢膜梭菌D型(CP-D)陰性
陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為產氣莢膜梭菌D型(CP-D)陽性
綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑注意事項
1.操作嚴格按照說明書進行服務體系,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用搶抓機遇,酶標包被板開封后如未用完分析,板條應裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結晶析出全面闡釋,稀釋時可在水浴中加溫助溶非常激烈,洗滌時不影響結果。
4.封板膜只限一次性使用引人註目,以避免交叉污染領域。
5.底物請避光保存。
6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準探索創新,使用雙波長檢測時帶來全新智能,參考波長為630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理新產品。終止液為2M的硫酸去完善,使用時必須注意安全。
綿羊產氣莢膜梭菌D型(CP-D)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃長遠所需。
2.有效期:6個月