酶標(biāo)儀國產(chǎn)和進(jìn)口怎么選擇
建議采購進(jìn)口產(chǎn)品求得平衡。國產(chǎn)產(chǎn)品不能測讀384孔板進(jìn)口產(chǎn)品精確度好,穩(wěn)定性高空間廣闊,可測讀384孔板至關重要。
酶標(biāo)儀方法與原理
1.1濾光片波長精度檢查及其峰值測定
1.1.1方法及其衡量的標(biāo)準(zhǔn):用高精度紫外可見分光光度計(波長精度±0.3nm)對不同波長的濾光片進(jìn)行光譜掃描,檢測值與標(biāo)定值之差即為濾光片波長精度服務品質,其差值越接近于零且峰值越大表示濾光片的質(zhì)量越好的發生,波長精度越高。
1.1.2理論基礎(chǔ):酶標(biāo)儀的濾光片質(zhì)量好壞影響,直接影響儀器的靈敏度高低重要手段,而濾光片的質(zhì)量又是以其波長精度及其峰值指標(biāo)來衡量的,因此濾光片波長精度及峰值是衡量酶標(biāo)儀的重要參數(shù)之一穩定性,這在廠家的儀器說明書中雖未曾提及像一棵樹,但在儀器的實(shí)際使用過程中,我們發(fā)現(xiàn)對濾光片波長精度和峰值進(jìn)行檢查是重要的也是必要的去突破,通過檢查可以發(fā)現(xiàn)濾光片的波長標(biāo)定值與實(shí)測值的符合程度能運用,可以發(fā)現(xiàn)濾光片的質(zhì)量是否符合要求達到。
1.2靈敏度和準(zhǔn)確度的監(jiān)測
1.2.1方法:①靈敏度:精確配制6ug/ml重鉻酸鉀(干燥)溶液(0.05mo1/L硫酸溶解),加入200ul重鉻酸鉀溶液于小孔杯中不可缺少,以0.05mo1/L硫酸溶液作空白蓬勃發展,于450nm(參比波長650nm)測定,其吸光度應(yīng)≥0.01A積極回應。②準(zhǔn)確度:準(zhǔn)確配制:1mmo/L對硝基*(提純品)水溶液重要性,然后以10mmo1/L氫氧化鈉溶液25倍稀釋之,加入200ul稀釋液于小孔杯中多種場景,以10mmo1/LNaOH溶液作空白多元化服務體系,于405nm(參比波長650nm)檢測,其吸光度應(yīng)在0.4A(0.395~0.408A)左右使用。
1.2.2說明:儀器的靈敏度和準(zhǔn)確度主要受兩個因素影響:一是濾光片波長的精度大幅拓展,二是檢測器的質(zhì)量發行速度。通常情況下更加堅強,濾光片原因?qū)е聝x器的靈敏度和準(zhǔn)確度下降比較容易檢查;而檢測器質(zhì)量差異則不易被發(fā)現(xiàn)性能,因此我們采用上述兩種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液對儀器檢測器的質(zhì)量進(jìn)行定期監(jiān)測初步建立,從而保證了儀器檢測結(jié)果的可靠性。對于儀器準(zhǔn)確性的測定供給,我們采用了文獻(xiàn)報道的方法的方法,經(jīng)過多次在不同型號儀器間進(jìn)行反復(fù)測定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)該標(biāo)準(zhǔn)物溶液在450nm波長處有一較為恒定的測定值進行探討,由于酶標(biāo)儀與其它分光光度計的光學(xué)原理不*相同落到實處,故是否可以作為評價酶標(biāo)儀準(zhǔn)確性的參考方法還有待同行進(jìn)一步研究考證。
1.3通道差與孔間差檢測
1.3.1方法及其表達(dá)方式:①通道差檢測:取一只酶標(biāo)板小孔杯(杯底須光滑最新、透明技術創新、無劃痕、無污染)以酶標(biāo)板架作載體重要作用,分別加入三種不同濃度的甲基橙溶液200u后置于8個通道的相應(yīng)位置優化服務策略,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長(測定波長490nm發展基礎,參比波長630或650nm兩個角度入手,以下均相同)連續(xù)測三次,觀察其不同通道之間測量結(jié)果的一致性可用極差值來表示其通道差同期。②孔間差的測量:選擇同一廠家生產效率、同一批號酶標(biāo)板條(8條共96孔)分別加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.065~0.070A)先后置于同一通道,蒸餾水調(diào)零效果,采用雙波長檢測使用,其誤差大小用±1.96s衡量強化意識。
1.3.2理論解釋:為了提高酶標(biāo)儀的檢測速度,根據(jù)96孔酶標(biāo)板的規(guī)格特點(diǎn)基本情況,目前大多數(shù)廠家的中現場、高檔酶標(biāo)儀均采用8通道的檢測器(部分中、低檔酶標(biāo)儀目前仍采用單通道).因而它們每個通道的檢測能力是不盡相同的力量,它是儀器內(nèi)部的固有誤差我有所應,與所測溶液濃度成正相關(guān)(不同檢測器對不同濃度溶液的響應(yīng)能力不同),所以通道差是衡量酶標(biāo)儀性能良好與否的重要指標(biāo)之一深入實施;其衡量指標(biāo)用極差表示至關重要,這與廠家推薦的指標(biāo)是一致的;極差值越接近于零效果,通道差越小有所應,說明同一樣品于不同通道檢測結(jié)果的一致性越好。
由于不同廠家合作關系、不同批號酶標(biāo)板之間的質(zhì)量差異著力提升,導(dǎo)致孔與孔之間的檢測結(jié)果也不*一致,這與水平光路光度計的比色皿質(zhì)量是否符合要求一樣傳遞,因此我們認(rèn)為孔間差是儀器外部的固有誤差融合,只有準(zhǔn)確測知孔間差,并對結(jié)果作出相應(yīng)的校正相關性,才能使檢驗(yàn)結(jié)果更符合實(shí)際情況完成的事情、更準(zhǔn)確可靠;采用的評價指標(biāo)(士1.96s)也是有利于結(jié)果校正的穩定。另外改造層面,在設(shè)計孔間差測量的操作方法上,我們將200ul甲基橙溶液吸光度調(diào)至0.065~0.070A品質,是充分考慮到加樣器的誤差(上海求精公司利用好,200ul,士2%CV)最為顯著,其目的是使加樣誤差控制在儀器的分辨率(0.01A)以下尤為突出,這樣也就避免了孔間差結(jié)果不因加樣誤差而導(dǎo)致假性增高。
1.4零點(diǎn)飄移
1.4.1方法:取八只小孔杯環境,分別置于八個通道的相應(yīng)位置空間載體,均加入200ul蒸餾水并調(diào)零,采用雙波長或單波長(490nm)每隔30min測定一次相對簡便,觀察8個通道4h內(nèi)的吸光度變化重要組成部分。其與零點(diǎn)的差值即為零點(diǎn)飄移。
1.4.2測量原理:酶標(biāo)儀的零點(diǎn)飄移通常是很小的合作,這是由于儀器在讀數(shù)之前勃勃生機,先要做8個通道的本底測量(Io).然后再讀取樣品板的各孔測定值(I)助力各業,根據(jù)Beer'slaw光吸收值=1ogl0(Io/I),每次讀數(shù)經(jīng)過如此的自動校正提供有力支撐,使得讀數(shù)誤差大大降低應用,這樣的測讀方式無疑是非常正確的的;另外有的儀器是應(yīng)用"DRLDYE"檢測試條來進(jìn)行吸光度的校準(zhǔn)的品率,因此在采用單波長測量時相貫通,會導(dǎo)致吸光度的假性增高,這種儀器可采取兩種方法進(jìn)行校正積極影響,一是選擇一合適的參比濾光片進(jìn)行雙波長測定自動化方案,二是引入修正參數(shù),即在吸光度模式下單波長讀取1個空白孔越來越重要,其測試值和預(yù)測值之差值即為修正參數(shù)線上線下。所以零點(diǎn)飄移是評價儀器在一定時間內(nèi)零點(diǎn)吸光度的變化趨勢,與波長無關(guān)醒悟,它間接地反映了儀器內(nèi)部檢測系統(tǒng)在單位時間內(nèi)處于工作狀態(tài)下的穩(wěn)定性及儀器的機(jī)械性能情況(連續(xù)進(jìn)板數據顯示、檢測、退出)能運用,故它是評估儀器內(nèi)部電路系統(tǒng)達到、光學(xué)系統(tǒng)(檢測器)及機(jī)械系統(tǒng)良好與否的指標(biāo)智能設備。
1.5精密度評價
1.5.1方法及評價指標(biāo):每個通道三只小杯不可缺少,分別加入200ul高、中技術特點、低三種不同濃度的甲基橙溶液提高鍛煉,蒸餾水調(diào)零,采用雙波長作雙份平行測定凝聚力量,每日測定兩次有所提升,連續(xù)測定20天。分別計算其批內(nèi)精密度新的力量、日內(nèi)批間精密度先進水平、日間精密度和總精密度及相應(yīng)的CV值。
1.5.2理論依據(jù):1984年美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會發(fā)表了EP5一T文件并于1992年進(jìn)行了第二次修訂:臨床化學(xué)儀器精密度性能的用戶評價全面展示。該評價方案在生化分析儀重要平臺、血細(xì)胞計數(shù)儀等儀器和試劑的評價中得到了廣泛的應(yīng)用,使評價儀器的方法得到了統(tǒng)一核心技術;而該法應(yīng)用于酶標(biāo)儀的評價在國內(nèi)外則尚未見有類似的報道應用提升,我們采用該法對酶標(biāo)儀進(jìn)行系統(tǒng)評價,結(jié)果是比較滿意的創造性。各指標(biāo)的意義為:批內(nèi)精密度系由20d中每天兩批發展的關鍵,每批兩次之差(即"批內(nèi)")經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理后所得的結(jié)果道路;日內(nèi)批間精密度系由20d中每天兩批測定結(jié)果均值之差(即"批間")經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理后所得的結(jié)果;日間精密度表示20d中每天所測均值的標(biāo)準(zhǔn)差即標(biāo)準(zhǔn)誤真諦所在,反映了每日均值的離散度指導;總精密度則是對批內(nèi)、批間和日間精密度進(jìn)行加權(quán)統(tǒng)計的結(jié)果充分。其中以批內(nèi)精密度和總精密度的應(yīng)用廣泛規則製定,與傳統(tǒng)的批內(nèi)精密度的計算方法(即對同一標(biāo)本在同一天內(nèi)同時重復(fù)測定多次)相比,前者更符合實(shí)驗(yàn)室的實(shí)際情況優化服務策略,更有代表性關規定,也更加合理;而總精密度則客觀地全面地反映了實(shí)驗(yàn)室的總體變異情況兩個角度入手。
1.6線性測定
1.6.1方法:精確稱取甲基橙配制5個系列濃度的溶液建強保護,采用雙波長平行檢測8次求其均值。計算回歸方程生產效率、相關(guān)系數(shù)r及標(biāo)準(zhǔn)估計誤差Sy,x使命責任,并用±1.96Sy,x表示樣品的95%測量范圍。
1.6.2評價指標(biāo)解釋:線性測定也是評價儀器的重要手段之一使用,因?yàn)樗莾x器開展定量工作的基礎(chǔ)和前提情況較常見,某些廠家用標(biāo)準(zhǔn)估計誤差s來衡量線性,這與實(shí)驗(yàn)室通常所采用的相關(guān)系數(shù)r是一致的主要抓手,因此在進(jìn)行線性評估時體製,我們同時報告r和Sy,x,目的是為了增強(qiáng)用戶與廠家之間的可比性創新科技。
1.7雙波長評價
1.7.1方法:在運(yùn)用酶標(biāo)儀檢測樣品時服務延伸,由于溶液中的小氣泡、杯底的水紋印及劃痕具有重要意義、小孔杯之間透明度的差異等等進一步,這些都是儀器測定過程中見的干擾因素,而標(biāo)本中的干擾組份(如溶血強大的功能、黃道)因洗滌而對測定結(jié)果影響則較小實際需求,因此我們將文獻(xiàn)中的雙被長評價方法改為:取同一廠、同一批號酶標(biāo)板條(每個通道2條共24孔)每孔加入200ul甲基橙溶液(吸光度調(diào)至0.065~0.070A)先后于8個通道分別采用單波長(490nm)和雙波長(測定波長490nm優勢、參比波長630/650nm)進(jìn)行檢測善謀新篇,計算單波長和雙波長測定結(jié)果的均值、離散度結構,比較各組之間是否具有統(tǒng)計學(xué)差異以考察雙波長清除干擾因素的效果重要的作用。
1.7.2說明:雙波長測定過程中,由于標(biāo)本中干擾組份的存在以及小孔杯本身質(zhì)量等原因規模最大,常常導(dǎo)致測定結(jié)果的假性增高穩中求進,而酶標(biāo)儀提供的雙波長測定功能則可以消除干擾組份或因素對測定結(jié)果的影響.對于標(biāo)本中干擾組份的清除統籌,在選擇參比波長時,我們應(yīng)對于擾組份的光譜進(jìn)行研究協同控製,以正確選擇參比波長振奮起來;而對于小孔杯本身質(zhì)量問題等干擾因素的消除,只要選擇遠(yuǎn)離測定波長的參比波長即可以了利用好、這對保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性是非常重要的深入各系統。
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