l  產(chǎn)品技術(shù)指標(biāo)

    rec-Protein A/Sepharose 比值：2.8~3.5mg rec-Protein A/ml Sepharose

    rec-Protein A分子量：34.85 KDa

    每分子rec-Protein A可結(jié)合IgG位點(diǎn)數(shù)：4個(gè)

    rec-Protein A可結(jié)合白蛋白位點(diǎn)數(shù)：無

    線性流速：300-500 cm/h

    耐壓指數(shù)：≤0.3 MPa（填料）

l  注意事項(xiàng)

請(qǐng)?jiān)趯?shí)驗(yàn)前仔細(xì)閱讀本rProtein A預(yù)裝柱使用說明。同時(shí)生產效率，將所要的所有試劑使命責任、耗材拿出置于室溫，恢復(fù)至室溫使用使用。

l  產(chǎn)品保存

產(chǎn)品儲(chǔ)存于2-8℃合規意識，保質(zhì)期兩年。 

l  rec-Protein A預(yù)裝柱純化IgG抗體步驟

以下實(shí)驗(yàn)方法適用于從血清或腹水中純化IgG抗體主要抓手，不同來源的IgG與rec-Protein A的結(jié)合能力不同體製，具體情況請(qǐng)參考表1。

1. 將血清或腹水樣品（*上樣量2 mL樣品/mL柱）裝入截留分子量3.5 KDa透析帶中創新科技，于4 ℃冰箱中對(duì)1× PBS（pH 7.4）透析過夜服務延伸；

2. 將rec-Protein A-Sepharose裝柱固定好，用10倍柱體積1× PBS（pH 7.4）平衡層析柱高效流通，建議流速為1 mL/min調解製度；

3. 將透析好的樣品從層析柱上端加入，建議流速為1 mL/min功能，為了獲得更好的抗體結(jié)合效果可將流穿液再上樣應用的因素之一，重復(fù)2遍（或?qū)悠?次性加入層析柱后置于搖床上，輕輕搖動(dòng)預期，結(jié)合30 min）敢於監督；

4. 樣品結(jié)合后，用20倍柱體積1× PBS(pH 7.4)洗滌層析柱結構，建議流速為1 mL/min重要的作用，勿讓層析柱滴干；

5. 洗脫IgG規模最大，向?qū)游鲋隙思尤胂疵撘海?00 mM*穩中求進，pH 2.7），用預(yù)先加有100 μL中和緩沖液（1M Tris最深厚的底氣，pH 9.0）的4 mL Ep管接收協同控製，2 mL /管，共收集10倍柱體積品質，進(jìn)行10 % SDS-PAGE電泳利用好，確定IgG樣品所在管，回收樣品解決問題。

6. 用5倍柱體積再生緩沖液（100 mM*系列，pH 2.0）進(jìn)行再生處理作用，再加入10倍柱體積ddH2O清洗層析柱。后于層析柱中加入10倍柱體積, 20% Ethanol慢體驗，4~8 ℃冰箱保存處理著力增加。

l 同類產(chǎn)品純化效果比較

  美國某的rProtein A Sepharose 4FF 親和層析柱對(duì)人血清進(jìn)行純化，其對(duì)人IgG的大結(jié)合量約為34 mg/mL Medium科技實力。 

表1 rProtein A與不同來源Ig的反應(yīng)活性情況

表2 rProtein A預(yù)裝柱系列產(chǎn)品參數(shù)