涂片及染色是微生物學的基本技術建議,也是觀察細菌Z簡單且行之有效的方法品率。通常情況下,由于細菌個體較小,較透明或半透明積極影響,如未經(jīng)染色往往不易觀察識別助力各行。因此借助于染色法可使細菌著色,與視野背景形成鮮明對比自主研發,從而易于在顯微鏡下進行觀察。
簡單染色法即只用一種染料對涂片進行染色更加廣闊,該法簡便易行損耗,適用于菌體的一般形態(tài)觀察。通常情況下由于細菌菌體多帶負電荷非常完善,易和帶正電荷的堿性染料結(jié)合而被染色性能穩定,因此常用堿性染料進行簡單染色,如美藍作用、堿性復紅情況正常、結(jié)晶紫、孔雀綠技術特點、番紅等提高鍛煉。所有的苯胺染料,均可用來做簡單染色法的染色劑凝聚力量。在進行染色之前的制片過程是影響染色結(jié)果好壞的關鍵性步驟有所提升。
制備細菌染色片一般要經(jīng)過涂片、固定新的力量、染色先進水平、水洗、干燥等步驟(見下圖),然后用顯微鏡全面展示,甚至油鏡觀察重要平臺。
(一)涂片
取一干凈的載玻片,滴加一小滴蒸餾水于載玻片*核心技術。按無菌操作要求應用提升,接種環(huán)經(jīng)灼燒滅菌,待冷卻后用接種環(huán)從菌種試管斜面上(培養(yǎng)皿表面)挑取少量培養(yǎng)物(不要挑破培養(yǎng)基),置于載玻片上的水滴中創造性,與水混合并輕輕涂布成直徑約1cm左右的均勻薄層要素配置改革。操作完成后,接種環(huán)要再經(jīng)灼燒滅菌保障性,放歸原處帶動產業發展。
(二)干燥
將涂片于室溫中自然干燥或者置于酒精燈火焰高處,微熱烘干十分落實。切記不能直接在火焰上烘烤倍增效應,以免菌體烤焦變形,影響對菌體的觀察設施。
(三) 固定
涂片標本面向上需求,快速通過酒精燈火焰外焰2次~3次堅定不移,進行標本固定。固定的目的在于殺死細菌以固定其細胞結(jié)構(gòu)更讓我明白了;保證菌體牢固地粘附在載玻片上迎難而上,染色或水洗時不至于脫落;同時改變菌體對染料的通透性探索,有利于著色堅持先行,增強染色效果。固定時滿意度,以載玻片背面加熱處觸及皮膚而不覺過燙為宜(一般不超過60 ℃ )情況較常見。
(四)染色
標本玻片水平放置,滴加1滴~2滴染色液主要抓手,使染色液*覆蓋涂片區(qū)域體製,染色時間視不同標本和染料的性質(zhì)而定。
(五)水洗
染色到一定時間后創新科技,傾去染液服務延伸,斜置玻片, 自玻片上端用自來水沖洗至流下的水無色為止具有重要意義;或?qū)⒉F糜诓F苌险{解製度,用洗瓶傾注水流進行水洗。注意沖洗水流不宜過急功能、過大應用的因素之一,同時要避免直接沖在涂片處,導致涂片受損預期。
(六)干燥敢於監督、鏡檢
自然晾干,或用吸水紙吸去玻片上的多余水分后再晾干結構,但要注意勿將菌體抹掉重要的作用。*干燥后,用顯微鏡甚至油鏡檢查規模最大。
注意事項:
(1)載玻片要清潔無油污穩中求進,否則菌液不易涂開。涂片時取培養(yǎng)物宜少系統性,培養(yǎng)物涂層宜薄勇探新路,涂層過厚則不易觀察細菌形態(tài)。
(2)干燥和固定時傳遞,玻片不能直接在離火焰很近的位置上烘烤試驗,否則會破壞細菌形態(tài)并使之變形,影響觀察結(jié)果。
(3)觀察時如需用到油鏡製度保障,油鏡檢查前玻片應*干燥預下達,觀察后要將油鏡用擦鏡紙等*擦拭干凈。