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上海古朵生物科技有限公司
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賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B的使用方法及注意事項(xiàng)

時(shí)間:2019/10/14閱讀:242
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  賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B是利用溴化氰法通過賴氨酸的α-氨基將其鍵合在瓊脂糖凝膠上等特點,賴氨酸上游離的ε-氨基和α-羧基可以和一系列的生物分子相互作用姿勢。主要用于纖維蛋白溶酶原有序推進、血纖維蛋白溶酶原激活劑和核蛋白體核糖核酸的分離以及雙鏈DNA的純化技術先進。
 
  賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B產(chǎn)品參數(shù)
 
  產(chǎn)品名稱:賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B(lysine- Sepharose 4 B)
 
  貨號(hào):S8911
 
  基質(zhì):6% 交聯(lián)瓊脂糖凝膠
 
  配基: 賴氨酸
 
  配基密度:4-7μmol/mL
 
  顆粒大羞M一步。?5-165μm
 
  每毫升結(jié)合量:0.6mg血纖維蛋白溶酶原
 
  大流速:75cm/h
 
  工作pH:2~11
 
  化學(xué)穩(wěn)定性:在所有的水溶性緩沖液中保持穩(wěn)定大部分;
 
  操作溫度:室溫
 
  賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B使用方法
 
  1.裝柱
 
  (1)將所有的試劑和填料達(dá)到室溫.配制初始緩沖液(平衡液)和緩沖液。
 
  (2)根據(jù)柱子大小取所需凝膠的量應用的因素之一,清洗掉20%乙醇解決,抽干,用初始緩沖液(按凝膠:緩沖液=3:1比例)配成勻漿敢於監督。
 
  (3)將柱內(nèi)及柱子底端用水或緩沖液潤濕并保持一小段液體(液面略高于濾膜)幅度,務(wù)必使底端無氣泡。
 
  (4)用玻璃棒引導(dǎo)勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi)重要的作用,注意不要使用氣泡貢獻。打開柱子出液口,使凝膠在柱內(nèi)自由沉降力度,連結(jié)好柱子頂端柱頭明確了方向。
 
  (5)打開蠕動(dòng)泵,讓緩沖液用使用時(shí)流速的1.33倍的流速流過勇探新路,使柱床穩(wěn)定單產提升。用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。
 
  2.平衡
 
  讓平衡緩沖液以一定流速流過柱子試驗,到流出液電導(dǎo)和pH不變勞動精神。
 
  3.上樣
 
  可以根據(jù)上樣物質(zhì)的性質(zhì)選擇合適pH的緩沖液,通常建議使用pH 為7.5的磷酸鹽緩沖液製度保障。
 
  4.洗脫
 
  通常使用gao2M濃度的鹽溶液進(jìn)行洗脫預下達,也可以選擇梯度洗脫或者溫度梯度洗脫。
 
  5.再生
 
  再生取決于樣品的性質(zhì)統籌推進,賴氨酸瓊脂糖4 B可以用2 - 3床體積的高pH值(0.1 M Tris-HCl方案,0.5 M氯化鈉關鍵技術,pH值8.5)和低pH值(0.1 M醋酸鈉,0.5 M氯化鈉深入,pH值4.5)交替洗滌再生技術研究。重復(fù)3次,緩沖液每次至少5柱床體積深刻變革。
 
  如果在分離的過程中使用了去垢劑或者變性劑結論,在再生的過程中也可以使用。
 
  純化纖溶酶原后質生產力,應(yīng)該使用pH為7.5的 50 mM(含有1 M氯化鈉和0.2 M ε-氨己酸)的磷酸鹽再生適應性強。核酸純化后,用至少5倍柱體積的pH為7.5的的50 mM的磷酸鹽(含2 M氯化鈉)清洗再生先進的解決方案。
 
  6.在位清洗
 
  在一些使用的程序中拓展,如果存在不容易洗脫的沉淀蛋白或者脂類物質(zhì),可以用
 
  0.1%的Triton沖洗一分鐘宣講活動,清洗完畢后不斷進步,立刻用至少5倍柱體積緩沖液平衡柱子。
 
  賴氨酸-瓊脂糖凝膠4B注意事項(xiàng)
 
  (1)凍干的賴氨酸瓊脂糖凝膠4B 密封貯存于8°C以下干燥的地方效率,溶脹的凝膠應(yīng)貯存在4-8°C(保存溶液為20%乙醇)規模,不能冷凍。
 
  (2)在裝柱講道理、使用和保存柱子的時(shí)候發展目標奮鬥,要避免柱子流干,氣泡進(jìn)入落地生根。

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