1、流式細(xì)胞儀上的FL2-W FL2-A FL2-H分別是做什么的確定性?
FL2-W是只檢測(cè)熒光的脈沖寬度, FL2-H是指脈沖高度不同需求。通常在做細(xì)胞周期分析時(shí)應(yīng)用發展,用于去除粘連細(xì)胞。
2總之、流式同型對(duì)照怎樣選擇面向?
同型對(duì)照(Isotype Control):使用與一抗相同種屬來源、相同亞型研學體驗、相同劑量和相同的免疫球蛋白及亞型的免疫球蛋白建設項目,用于消除由于抗體非特異性結(jié)合到細(xì)胞表面而產(chǎn)生的背景染色規模。如果一抗是多抗,可以用an normal serum(與一抗相同的正常血清) (must be the same species as primary antibody)講道理。This control is easy to achieve and can be used routinely in immunohistochemical staining.這個(gè)可以咨詢?cè)噭┥贪l展目標奮鬥。同型?duì)照為免疫熒光標(biāo)記中的陰性對(duì)照。由于熒光標(biāo)記單抗的組來源不同更多的合作機會,應(yīng)選用相同來源的未標(biāo)記單抗作為同型對(duì)照來調(diào)整背景染色延伸。舉個(gè)例子:比如檢測(cè)一抗為單抗的mouse anti rat CD11b,clone OX-42 purified IgG服務好,那么它的isotype 是mouse IgG2a新趨勢,所以可以用purified(純化的) mouse IgG2a來做OX-42的同型對(duì)照(Isotype Control)。一般的的生物技術(shù)公司和國內(nèi)的代理都有出售共謀發展。
同型對(duì)照:是指與MoAb相同的學習、未免疫小鼠的免疫球蛋白亞類,若使用直接免疫熒光染色法聽得懂,同型對(duì)照也應(yīng)標(biāo)記熒光色素應用優勢,如IgG1 FITC、IgG2a全方位、PE等高效節能。主要考慮了細(xì)胞的自發(fā)熒光、FC受體介導(dǎo)的抗體結(jié)合和非特異性抗體結(jié)合等影響因素大局。此外新創新即將到來,同型對(duì)照與MoAb所標(biāo)記的熒光色素、濃度有序推進、F:P比值(標(biāo)記的熒光色素與免疫球蛋白分子的比值)應(yīng)該相同為*設施,這對(duì)準(zhǔn)確設(shè)定陰性與陽性細(xì)胞的界標(biāo)有重要意義,切忌使用與MoAb不相匹配的同型對(duì)照堅定不移,為同一實(shí)驗(yàn)室更優質、采用相同工藝或方法制備(如同一品牌)的產(chǎn)品。
3對外開放、流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)游離鈣濃度為何要使用氯化鈣技術創新?
在文獻(xiàn)及其他專業(yè)網(wǎng)zhan中都有測(cè)定游離鈣的方法,具體如下:
(1)鈣熒光探針負(fù)載資料;
(2)隨機(jī)測(cè)定每管細(xì)胞懸液樣品(以下簡稱樣品)的單個(gè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度廣泛應用,記為F值。
(3)加入10%Triton X 100橫向協同,(破膜用)哪些領域;加入1 mmol/L氯化鈣,(問題所在)不斷創新,吹打均勻建立和完善,孵育1~10min提供了遵循,測(cè)定熒光即Fmax值。
(4)加入EGTA大型,20%26mu;l(鈣螯合劑)服務效率,孵育1~10min,激發(fā)波長488nm測(cè)定熒光重要意義,即Fmin值統籌發展。
這個(gè)過程中的氯化鈣的作用如何, 請(qǐng)高人指點(diǎn)體系,謝謝生產製造。
因?yàn)檎Q獫{中Ca2+濃度是1mM,細(xì)胞外液的Ca2+對(duì)細(xì)胞內(nèi)Ca2+有影響攜手共進。加0.1%triton是增加膜通透性共同,使細(xì)胞外Ca2+進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),作為大值經過。加EGTA是為了螯合Ca2+簡單化,作為小值.生理環(huán)境中細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度遠(yuǎn)低于細(xì)胞外液(大約1:10000),細(xì)胞膜對(duì)鈣的通透性變化對(duì)細(xì)胞內(nèi)鈣影響很大解決方案。
4優勢、流式與werstern的區(qū)別善謀新篇?
知道一些增產,不足之處請(qǐng)大家補(bǔ)充:
(1)Western 是檢測(cè)蛋白表達(dá)的金標(biāo)準(zhǔn),可用于檢測(cè)細(xì)胞多種類型的蛋白方法;流式細(xì)胞術(shù)的方法多用于檢測(cè)細(xì)胞膜蛋白高產,雖然也可通過Triton-X100給細(xì)胞打孔的方法來檢測(cè)胞內(nèi)蛋白,但對(duì)于分泌蛋白卻是無能為力的發揮作用;(2)Western測(cè)蛋白含量對(duì)抗體的量需要很少良好,一般1:1000左右,而流式對(duì)抗體的需要量很大銘記囑托,一般1:50(很浪費(fèi)抗體)引領;(3)采用Western方法檢測(cè)細(xì)胞蛋白含量的變化一般要有內(nèi)參,而流式一般要把每個(gè)樣品分為兩份示範,同時(shí)都做只加二抗(FITC標(biāo)記的)的對(duì)照應用前景,這樣平均到每個(gè)細(xì)胞的發(fā)光就不用內(nèi)參了;(4)就個(gè)人經(jīng)驗(yàn)而言運行好,流式用多抗不好首次,單抗標(biāo)出來不錯(cuò)。
不過流式的應(yīng)用原理主要還是抗原和抗體反應(yīng)和western部署安排、免疫組化沒有本質(zhì)差別搖籃,但是由于免疫組化和western都有酶催化底物的放大體系技術,因此,流式不適合檢測(cè)低表達(dá)的蛋白推動,低表達(dá)的還是采用western(尤其是化學(xué)發(fā)光底物更佳)和免疫組化更好相對較高。當(dāng)然,流式大的一個(gè)特點(diǎn)就是信息,可以定量(百分比)姿勢,如果是高表達(dá)的用流式細(xì)胞儀非常有優(yōu)勢(shì)。
5首要任務、FL1綠色化,FL2,FL3的區(qū)別是什么?
是指在不同位置測(cè)得的熒光?還是不同波長的熒光?這3個(gè)參數(shù)到底測(cè)的是什么?有什么意義?
你的理解是正確的發展,其實(shí)FL1保持穩定, FL2, FL3 是指不同的熒光通道.舉個(gè)例子來說吧.我們用FITC/PE雙標(biāo)記的細(xì)胞面向,在488nm的激光激發(fā)下支撐作用,這兩種熒光染料分別發(fā)出波長不同的綠色和橙色熒光,然后這發(fā)出的熒光再通過濾光片分開建設項目,對(duì)應(yīng)的是不同的波長的濾光片最為突出,一般在fl1那的是530nm的濾光片,在FL2那的是575nm的濾光片自動化,這樣就可以把在一起的熒光分開了提升。
6、用于做Western或ELISA的一抗可否用于流式細(xì)胞術(shù)不折不扣?
看你說明書上是怎么說的了支撐能力,如果沒有說就不可以做流式,需要另外買了高效利用。
7特征更加明顯、MFI和GFI的意義?
Geo Mean講理論,叫做幾何均數(shù)(geometric mean)的可能性,常用于等級(jí)資料和對(duì)數(shù)正態(tài)分布資料,和常用的算數(shù)均數(shù)(mean)的計(jì)算方法不同服務為一體。%26ldquo; %total或者%gate的結(jié)果%26rdquo;代表的是百分率問題,即細(xì)胞占總體細(xì)胞或者是門內(nèi)細(xì)胞的百分比;用百分比作為統(tǒng)計(jì)指標(biāo)要落實好,適用于熒光表達(dá)較強(qiáng)的指標(biāo)緊密相關。我看到你的流式圖上,檢測(cè)樣本的熒光強(qiáng)度不是很強(qiáng),屬于弱表達(dá)的指標(biāo)培訓,若用百分率統(tǒng)計(jì)不合理波動,就是會(huì)失去一部分弱陽性的數(shù)據(jù)。我建議可以用平均熒光強(qiáng)度(也就是mean值)作為統(tǒng)計(jì)指標(biāo)重要工具,比較熒光強(qiáng)度的變化積極拓展新的領域。
8、流式技術(shù)中的APC更優質,pure標(biāo)記是什么意思呢?
熒光物質(zhì)通常是指那些在受到一個(gè)波長激發(fā)后相對開放,處于一個(gè)能量不穩(wěn)定的狀態(tài),能發(fā)射一個(gè)波長比激發(fā)波長長的光的一類物質(zhì)脫穎而出。當(dāng)然熒光并不都是受激發(fā)后發(fā)射的拓展應用,如一些生物可以發(fā)射熒光,如熒火蟲結構,發(fā)光細(xì)菌等管理,他們發(fā)出的光是通過體內(nèi)的酶促反應(yīng)而產(chǎn)生的,這個(gè)酶通常被稱為熒光素酶.EB是一種熒光物質(zhì)能力建設,它在受到紫外線照射后可以發(fā)出一可見光戰略布局,常用于DNA、RNA電泳中表現明顯更佳。
APC
英文全名:allophycocyanin狀態;中文名:別藻青蛋白;大吸收峰:650nm指導,大發(fā)射熒光峰:660nm廣泛認同,適用于雙激光流式儀,可被600-640nm波長的激光激發(fā)增持能力。
PerCP
英文全名:peridinin chlorophyll protein共同努力,中文名:多甲藻葉綠素蛋白;大激發(fā)波峰490nm追求卓越,被488nm的氬離子激光激發(fā)后,發(fā)射光峰值約為677nm參與能力,與FITC合理需求、PE進(jìn)行多色熒光染色補(bǔ)償重疊較少,非特異性結(jié)合也較少充分發揮。雖然較易使用高質量,但量子產(chǎn)量不高,多用于檢測(cè)表達(dá)較高的抗原選擇適用。
9管理、怎樣用流式細(xì)胞儀來鑒定小鼠BMDC?
檢測(cè)小鼠BMDC主要是從形態(tài)學(xué)和細(xì)胞表面分子兩方面來鑒定我做的時(shí)候就做了普通光鏡下形態(tài)業務指導、電鏡(掃描和透射)改進措施,另外檢測(cè)了小鼠BMDC表面的共刺激分子如CD86 就此掀開、CD11、CD80今年。還做了MHC II類分子的檢測(cè)穩步前行,還有MHCI類分子的檢測(cè),這些分子在DC表面都不是特異存在的動手能力,在巨噬細(xì)胞逐步改善、淋巴細(xì)胞表面也有表達(dá),所以目前并沒有非常特異性的方法檢測(cè)你的細(xì)胞一定就是DC提升,但是從形態(tài)和表面分子的檢測(cè)結(jié)合來看大大提高,效果就比較好了.一般在幼稚的DC上述分子表達(dá)水平較低,DC成熟過程中研究成果,上述分子表達(dá)呈上調(diào)趨勢(shì)高質量,你可以在不同的培養(yǎng)時(shí)間分別檢測(cè)。
10激發創作、請(qǐng)問流式細(xì)胞術(shù)單抗直接熒光需要幾種對(duì)照前景?
首先確認(rèn)你用的直標(biāo)抗體的熒光染料是什么,再確定該抗體的來源種屬增幅最大,選擇相應(yīng)的同型對(duì)照共享應用。如:你現(xiàn)在想檢測(cè)小鼠淋巴細(xì)胞表面的CD4抗原, 熒光染料為FITC標準, 抗體來源為大鼠的IgG1亞型示範推廣, 即Rat anti Mouse CD4-FITC (IgG1), 你所需要的同型對(duì)照就應(yīng)該是Rat IgG1-FITC即將展開, 一般的抗體說明上都會(huì)寫清大幅增加。
11、6孔板的細(xì)胞量能否做流式呀傳承?
對(duì)于6孔板而言等特點,每孔的表面積為10 cm2,依細(xì)胞種類不同在長滿時(shí)達(dá)到的數(shù)量從5*10的5次方到5*10的6次方不等多種。6孔板絕dui沒問題的將進一步!甚至24孔板也可以正常做。不過用于調(diào)試儀器參數(shù)的正常細(xì)胞要多準(zhǔn)備一些發展成就。
12成就、血液里的mononuclear cell(除外紅細(xì)胞,血小板和破碎的細(xì)胞碎片)開展面對面,能不能用細(xì)胞大小來gating系統,只看我關(guān)心的細(xì)胞?
(1)紅細(xì)胞還是小一些,無法100%區(qū)分空間廣闊,但還是可用把大部分紅細(xì)胞gate掉營造一處。
(2)溶血也很重要,如果你的紅細(xì)胞多的話支撐能力。(我猜不少資源優勢,如果用ficol的話)√卣鞲用黠@?梢杂寐然@溶液估算,如ACK(Lonzo),(3)CD45是所有白細(xì)胞都表達(dá)的方便,可以用來區(qū)分RBC vs. WBC13基礎上、細(xì)胞膜蛋白變化是用流氏檢測(cè)好,還是要做western?
膜蛋白的提取應用領域,好像很費(fèi)功夫保持競爭優勢,提取的不好,western結(jié)果也就不可信發展機遇。流式需要的抗體很少長效機製,流式能夠檢測(cè)陽性表達(dá)細(xì)胞的比例,western能對(duì)總的表達(dá)定量全技術方案,各有有缺點(diǎn)分享。
14、FCM檢測(cè)表達(dá)結(jié)果到底是用百分比還是MFI信息化?
我作出是單峰方式之一,原本我覺得用MFI表示較好。但我做的2個(gè)蛋白很奇怪新型儲能,一個(gè)表達(dá)率高創新能力,但MFI值低;另一個(gè)表達(dá)率低範圍,但MFI值高求得平衡。我又作了SYBR GREEN 定量PCR,發(fā)現(xiàn)mRNA 的表達(dá)基本與百分比相符註入新的動力,而與MFI值不太一致領先水平。
個(gè)人認(rèn)為如果有明顯陰性細(xì)胞群和陽性細(xì)胞群,應(yīng)計(jì)算百分比雙重提升;無明顯分群,僅熒光強(qiáng)度發(fā)生變化的應(yīng)該用MFI事關全面。如果是整體峰移(或者叫單峰)表現明顯更佳,那么根本不存在MFI之外的任何合理的指標(biāo),不管MFI跟其它指標(biāo)吻合度如何,這就是客觀數(shù)據(jù)指導、客觀事實(shí)廣泛認同。
15、培養(yǎng)細(xì)胞的bcl-2及Bax蛋白的檢測(cè)流動性?
首先制成單細(xì)胞懸液鍛造,PBS洗滌后用胞內(nèi)染色試劑盒(很多公司都有,其實(shí)就是固定劑加增透/打孔劑)進(jìn)行處理具體而言,再進(jìn)行抗體孵育標(biāo)記染色工具,洗滌后上樣。
16喜愛、流式檢測(cè)胞內(nèi)抗原時(shí)打孔液的配方重要的角色?
打孔液有很多種,方法也有很多向好態勢。與你的實(shí)驗(yàn)方法相關(guān)平臺建設。我用過酒精固定或Triton X-100(我做的都是培養(yǎng)的細(xì)胞):
(1)70%的酒精固定24小時(shí)即可,不再需要再打孔貢獻力量。如在PI染色測(cè)細(xì)胞周期或凋亡使用。
(2)Triton X-100是比較強(qiáng)烈的穿孔劑。0.1% Triton X-100/PBS(再加0.1%BSA) 是比較溫和一點(diǎn)發行速度。濃度可適當(dāng)提高更加堅強。作用時(shí)間以幾分鐘為宜。這個(gè)時(shí)間必須要自己試奮勇向前。時(shí)間長了細(xì)胞易破裂不斷豐富,短了則打孔不夠。如果你要染胞漿組建,則時(shí)間適當(dāng)短些各有優勢,如果要染內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或核內(nèi)等,由于要對(duì)兩層膜性結(jié)構(gòu)打孔重要的意義,時(shí)間當(dāng)然會(huì)長一些(3)可以試試0.1% saponin(皂素)
17持續、標(biāo)本必須在抗體染色后30分內(nèi)檢測(cè)嗎?
SOP是這么說的:
(1)Keep samples after staining covered with aluminum foil and at 4 0C (in the refrigerator) until they are run for flow analysis. The samples should be analyzed within 48 hours. Fluorescence loses its brightness if cells are not kept properly: not at 4 0C再獲, or are exposed to light(2)If cells are not fixed with paraformaldehyde產品和服務, keep the samples on ice and run them immediately after staining is accomplished因此,如果你沒有用PBS洗的話體驗區,可以用paraformaldehyde固定增多,放置48小時(shí)。洗了后應(yīng)該盡快檢測(cè)有望。如果做好不能及時(shí)檢測(cè)進一步推進,我們一般是加入等量的2%的多聚甲醛固定導向作用,4度冰箱避光貯存滿意度。一般過夜沒有問題具體而言,第二天同樣PBS 2ml 洗滌細(xì)胞一次,上機(jī)檢測(cè)用的舒心。
18創新延展、如何分選原始紅細(xì)胞強化意識?
CD71(轉(zhuǎn)鐵蛋白受體)--幼稚細(xì)胞的標(biāo)記
CD235(GPA)--紅細(xì)胞的標(biāo)記(小鼠有Ter119)
雙陽性細(xì)胞即為幼稚紅細(xì)胞,但無法區(qū)分原始及中晚幼紅.
19基本情況、請(qǐng)問流式檢測(cè)膜蛋白表達(dá)的變化用多克隆抗體出結(jié)果的機(jī)會(huì)大嗎現場?
流式的抗體和WB的抗體是不同的(有部分可以通用),多抗一般是大的變性蛋白為抗原制備的至關重要,而WB的中被檢測(cè)蛋白就是變性狀態(tài)不久前,所以很吻合,而流失中一般蛋白還是保持了天然構(gòu)象提升行動,所以產(chǎn)生的多抗可能不太好能力建設,而需要用很小特定的決定簇為抗原制備單克隆抗體。
20研究進展、在下近作人外周血流式無障礙,作表面及其胞內(nèi)染色,試劑說明書說要先分離外周血單個(gè)核細(xì)胞再染色快速融入,我有時(shí)候分的紅細(xì)胞比較多認為,其他的方法試過了,都改進(jìn)的不好增強,我擔(dān)心紅細(xì)胞會(huì)有影響重要意義,想在分離出PBMC以后如果紅細(xì)胞比較多的話,就用紅細(xì)胞裂解液裂解一下更加廣闊,但是我有如下問題規劃,希望這樣做過的同志指點(diǎn)一下,感激不禁可以使用。
(1)有人這樣在分離PBMC以后再裂解的嗎(我知道一般是在全血染色后再裂解紅細(xì)胞)進入當下?
(2)這樣會(huì)影響流式檢測(cè)嗎?
(3)用的裂解液配方是什么(是自己用過的)效高化。
(4)用法是什么{我是在如果PBMC分出來以后要是紅細(xì)胞比較多的時(shí)候使用新體系,這樣要怎樣把分出的PBMC稀釋,加多少裂解液 裂解多長時(shí)間創造,裂解后洗滌幾次等等}不難發現。
我曾做骨髓液分離單個(gè)核細(xì)胞而后做流式,一般來說用Ficoll分過之后即便還有紅細(xì)胞殘留環境,上流式也可通過%26ldquo;設(shè)門%26rdquo;根據(jù)細(xì)胞形態(tài)大小將紅細(xì)胞剔除改造層面。若紅細(xì)胞殘留太多供給,則可通過紅細(xì)胞裂解液進(jìn)一步去除之優勢與挑戰。我用的裂解液配方是:
碳酸氫鉀(KHCO3) 1.0g
氯化氨(NH4CL) 8.3g
EDTA-Na2 0.037g 加雙H2O至1000ml經驗分享,為工作液。
配好后4度冰箱保存趨勢,使用時(shí)效果更好有力扭轉。我是在Ficoll分過之后用的,所以一般根據(jù)離心后EP管里細(xì)胞團(tuán)的大小加紅細(xì)胞裂解液一站式服務,通常5ml骨髓液分離單個(gè)核細(xì)胞后得到的細(xì)胞再加500ul裂解液廣度和深度,震蕩混勻置2-5分鐘紅細(xì)胞就基本上裂解干凈了。洗滌次數(shù)看白細(xì)胞多少而定引領作用,因?yàn)橄吹拇螖?shù)越多加強宣傳,損失就越多。我一般洗一到兩次就OK了.做了很久沒發(fā)現(xiàn)這樣處理影響結(jié)果用的舒心。有一點(diǎn)技術發展,我是在這樣處理后才標(biāo)記抗體的,樓上的說是標(biāo)記過才溶紅細(xì)胞集成,所以建議在溶的時(shí)候時(shí)間不宜過長重要手段,洗滌次數(shù)也不宜過多,以免將標(biāo)記上的單抗洗脫穩定性。
21像一棵樹、請(qǐng)問下表中流式細(xì)胞儀給出的平均值是什么意思,是怎樣得到的去突破,有些文獻(xiàn)中提到%26ldquo;fluorescence per cell%26quot;能運用,是下面的mean值嗎,還是要用mean值除以第1欄的細(xì)胞數(shù)events智能設備,才能得到fluorescence per cell不可缺少?
mean 值就是每個(gè)細(xì)胞的平均熒光強(qiáng)度,不用再除細(xì)胞數(shù)喜愛。這只是個(gè)相對(duì)值重要的角色,如果求絕dui值,應(yīng)用已知熒光劑濃度值對(duì)應(yīng)儀器給出的mean值向好態勢,做標(biāo)準(zhǔn)曲線平臺建設。以后你得到的mean值,就可以根據(jù)這條標(biāo)準(zhǔn)曲線查出真正的熒光濃度值註入了新的力量。
22重要的作用、流式中檢測(cè)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)水平的抗體有何區(qū)別?
抗體只是針對(duì)相應(yīng)抗原的去創新,至于是針對(duì)胞內(nèi)還是胞膜對(duì)你檢測(cè)來說并無明顯影響足夠的實力,你只需要查清楚到底是針對(duì)哪一個(gè)部位的抗原的緊迫性,應(yīng)該是可以用同一種抗體進(jìn)行檢測(cè)的,在流式操作時(shí)只需注意:如果是針對(duì)胞內(nèi)更適合,則需要加破膜劑高效,讓抗體能和相應(yīng)抗原接觸,否則就不需要了要素配置改革。
23體系、請(qǐng)教各位前輩:只要是熒光抗體久可以用于共聚焦顯微鏡嗎?
一般情況下都是可以的帶動產業發展。但有時(shí)候強(qiáng)度不夠責任製,需要選擇熒光強(qiáng)度大的染料,比如Alexa系列的倍增效應。
24規則製定、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期是否需要雞紅細(xì)胞作參照?
不用優化服務策略,標(biāo)準(zhǔn)微球做完laser alignment(光路校正)就可以了關規定。盡量把微球的各色CV值控制在1.5以內(nèi)。
25明顯、我現(xiàn)在要用間接法流式細(xì)胞術(shù)安全鏈,剛買了熒光二抗,是KPL的fluorescein-labeled affinity purified antibody to mouse IgG+IgM(H+L)produced in goat .說明說上提示要用TBS或是BSA或milk diluent/blocking solution液稀釋創新為先。稀釋至1:10~1:100真正做到。請(qǐng)問BSA是不是小牛血清,要用多少濃度的創新延展。TBS液我沒有強化意識,還有可否用注射用水稀釋。
BSA:牛血清白蛋白基本情況,濃度可以在一定范圍內(nèi)1%~5%現場,具體可參考其他抗體說明書。
TBS:Tris buffer saline力量。就是Tris的鹽溶液探討,很常規(guī)的溶液,配方:20mM Tris-HCl(ph8.0)高效流通,150mM NaCl調解製度。
你說的注射用水應(yīng)該就是生理鹽水吧,這對(duì)抗體來說是不利的功能,雖然在基礎(chǔ)條件很差的情況下會(huì)用這個(gè)溶液應用的因素之一,但是還不如PBS溶液。既然是做流式預期,按照正規(guī)程序操作抗體敢於監督,得到的結(jié)果也能反映真shi情況幅度。
26、流式細(xì)胞檢測(cè)中怎樣把對(duì)照和樣本的檢測(cè)結(jié)果放在一張圖中重要的作用?
分析獲取數(shù)據(jù)是分開進(jìn)行的貢獻,不可以混在一起上樣。首先通過陰性對(duì)照調(diào)節(jié)基本電壓各方面,固定條件后進(jìn)行樣品檢測(cè)防控,分別保存結(jié)果。利用流式軟件的multigraph中的overlap可以將陰性對(duì)照和樣品結(jié)果相應(yīng)圖進(jìn)行疊加適應性,這只是獲取數(shù)據(jù)后對(duì)結(jié)果的組合和加工。