實驗簡介
細胞因子在淋巴細胞免疫功能調(diào)節(jié)方面發(fā)揮重要作用，它可以調(diào)節(jié)多種細胞的生長、分化和功能，調(diào)節(jié)正常與病理狀態(tài)下的免疫應答。研究生理或病理免疫調(diào)節(jié)因素導致細胞因子合成的應答與改變是探尋疾病病因與免疫狀態(tài)關(guān)系的重要工具設備製造。
本實驗采用優(yōu)化的一管 8 色的多色檢測方案對人外周血 T 細胞亞群的 IFN-γ發展需要、IL-17、 顆粒酶管理、穿孔素表達情況進行了研究顯示。從實驗結(jié)果圖上可看出，本實驗在 CytoFLEX 上檢測時各細胞群體分群明顯效率和安，檢測結(jié)果確切可信設計能力，能夠非常漂亮地完成此類實驗。
材料與方法
? 試劑
? 樣品制備
| Sample Type | 外周血單個核細胞 |
| Species | 人 |
| Age of specimen | 樣本染色后 1 h 之內(nèi)完成上機檢測 |
| Prep Method | 1. 取 200 ul 全血加 200 ul1640極致用戶體驗，并加入適量 PMA 等試劑提供有力支撐，刺激 4 h； 2. 混勻后去 100 ul 刺激后的標本并加入相應膜抗建議，室溫避光孵育 20 min品率； 3. 加固定液，孵育后離心去上清不斷發展； 4. 加入適量生理鹽水積極影響，1500 rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 min 去除上清液； 5. 加破膜液混勻緊密協作，并加入相應胞漿抗體適量越來越重要，混勻后室溫避光，孵育 20 min發揮重要作用； 6. 加入適量生理鹽水醒悟，1500 rpm 轉(zhuǎn)速下離心 5 min 去除上清液數據顯示； 7. 重復 6； 8. 加入 300-500 ul 預冷的 PBS能運用，混勻后上機檢測達到。 |
數(shù)據(jù)分析
使用 CD45/SSC 設(shè)門，選取淋巴細胞群（設(shè)邏輯門排除掉混雜的單核細胞）不可缺少，然后再取 CD3+T 淋巴細胞蓬勃發展；分 別分析 Th 細胞與 TS 細胞的相關(guān)因子的表達情況。
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