細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)技術(shù) 

概述 

細(xì)菌的培養(yǎng)技術(shù)是微生物實(shí)驗(yàn)中基本技術(shù)之一首次。大多數(shù)細(xì)菌均可用人工方法培養(yǎng)可能性更大，只有將細(xì)菌  培養(yǎng)出來(lái)才能對(duì)它進(jìn)行研究和鑒定部署安排。 

知識(shí)點(diǎn)導(dǎo)航 

一.培養(yǎng)基的種類(lèi) 

培養(yǎng)基（culture medium）是細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的人工制品。適宜的培養(yǎng)基能使細(xì)菌在體外迅速生長(zhǎng)繁殖技術，便于對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離和鑒別推廣開來。可分為基礎(chǔ)培養(yǎng)基示範推廣、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基堅持好、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基大幅增加、厭氧菌用培養(yǎng)基和特殊培養(yǎng)基特性。 

        （一）基礎(chǔ)培養(yǎng)基只含有細(xì)菌生長(zhǎng)所需的基本營(yíng)養(yǎng)成分，應(yīng)用廣泛等特點，為制備多種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)建言直達，常見(jiàn)的有肉湯培養(yǎng)基、瓊脂培養(yǎng)基將進一步。 

        （二）營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入葡萄糖充分發揮、血液、血清成就、腹水或酵母浸膏等有機(jī)物重要方式，可供營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長(zhǎng)需要或增菌用。如結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基中添加雞蛋系統、馬鈴薯非常重要、甘油等。 

        （三）選擇培養(yǎng)基利用不同種類(lèi)細(xì)菌對(duì)化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同而制成空間廣闊，使分離菌大量繁殖而抑制其它細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基營造一處。培養(yǎng)基中含有的抑制劑能抑制非目的菌生長(zhǎng)或使其生長(zhǎng)不佳不折不扣，有利于目的菌的檢出和識(shí)別。選擇培養(yǎng)基多為固體平板資源優勢，用于從標(biāo)本中分離某些特定的細(xì)菌高效利用。 

        （四）鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加有某些特定成分，如糖估算、醇類(lèi)和指示劑等講理論，用于檢查細(xì)菌的各種生化反應(yīng)，以資鑒別和鑒定細(xì)菌不要畏懼。 

        （五）厭氧菌用培養(yǎng)基專(zhuān)性厭氧菌須在無(wú)氧條件下才能生長(zhǎng)服務為一體，故需在培養(yǎng)基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸鈉等還原劑逐漸顯現，降低培養(yǎng)基中氧化還原電勢(shì)全會精神，并應(yīng)與外界空氣隔絕，使培養(yǎng)基本身為無(wú)氧的環(huán)境拓展基地。 

        （六）特殊培養(yǎng)基為某些需要在特殊條件下才能生長(zhǎng)的細(xì)菌培養(yǎng)之用法治力量。如高滲鹽增菌培養(yǎng)基、高滲糖增菌培養(yǎng)基分享、改良 Kagan氏培養(yǎng)基等共享。 

二.培養(yǎng)基的制備 

制備一般培養(yǎng)基的主要過(guò)程基本相似，包括調(diào)配方式之一、溶化生動、調(diào)整 pH、過(guò)濾創新能力、分裝新品技、滅菌及檢定和保存。 三.細(xì)菌檢驗(yàn)室的注意事項(xiàng)及無(wú)菌技術(shù)  細(xì)菌培養(yǎng)必須隨時(shí)為防止污染和病原菌的擴(kuò)散而進(jìn)行操作求得平衡，即無(wú)菌操作紮實做。

細(xì)菌檢驗(yàn)室的注意事 項(xiàng)如下： 

        1．細(xì)菌的培養(yǎng)應(yīng)在接種罩或無(wú)菌室內(nèi)進(jìn)行。有條件的實(shí)驗(yàn)室可在超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行領先水平。 

        2．用接種環(huán)分離和移種細(xì)菌時(shí)，用前用后均需滅菌處理。一般采用火焰滅菌法戰略布局。 

        3．從培養(yǎng)瓶或試管培養(yǎng)物中取標(biāo)本或移種時(shí)事關全面，在打開(kāi)瓶口、管口或關(guān)閉前狀態，均要在火焰上通過(guò) 2～3次技術節能。切不可將含菌材料污染臺(tái)面和其他物體。 

        4．如不慎將試管等打破造成菌液污染時(shí)廣泛認同，不要驚慌國際要求，應(yīng)立即報(bào)告負(fù)責(zé)人流動性，然后用3％來(lái)蘇或5％ 石炭酸處理污染臺(tái)面或地面，至少浸泡30分種競爭激烈。 

        5．工作完畢后持續創新，用紫外光燈照射30分鐘，或用3％來(lái)蘇擦拭臺(tái)面空白區，并清洗雙手協調機製。 

三、培養(yǎng)法 

根據(jù)培養(yǎng)目的和細(xì)菌的種類(lèi)選用適宜的培養(yǎng)方法形勢。常用的有一般培養(yǎng)法實踐者、二氧化碳培養(yǎng)法（采用的是二氧化碳培養(yǎng)箱）和 厭氧培養(yǎng)法（采用厭氧培養(yǎng)箱）。 

        （一）一般培養(yǎng)法 一般培養(yǎng)法系指需氧菌或兼性厭氧菌等在需氧條件下的培養(yǎng)方法服務機製，故又稱(chēng)需氧培養(yǎng)法貢獻力量。將已接 種好的置37℃孵箱中培養(yǎng)18～24小時(shí)。但標(biāo)本中菌量很少或難于生長(zhǎng)的細(xì)菌（如結(jié)核分技桿菌）需培養(yǎng)3～7天甚至 l個(gè)月才能生長(zhǎng)大幅拓展。 

        （二）二氧化碳培養(yǎng)法某些細(xì)菌的培養(yǎng)發行速度，需要5～10%二氧化碳環(huán)境中培養(yǎng)才能生長(zhǎng)良好》e極性？刹捎枚趸寂囵B(yǎng)箱奮勇向前，它能自動(dòng)調(diào)節(jié)二氧化碳的濃度和溫度，使用極為方便實施體系。傳統(tǒng)的方法則采用燭缸法，將培養(yǎng)基放入缸內(nèi)各有優勢，點(diǎn)燃蠟燭放在缸中效果較好，加蓋（涂以凡士林）密閉。因燃燒而產(chǎn)生CO2大約占5～10%持續，基本可滿(mǎn)足細(xì)菌培養(yǎng)的要求等多個領域。 

        （三）厭氧培養(yǎng)法厭氧菌標(biāo)本的采集及運(yùn)送有特殊的要求及注意事項(xiàng)，應(yīng)避免正常菌群的污染產品和服務，盡量少接觸空氣并立刻送檢應用擴展。厭氧菌的培養(yǎng)法可大致分為：①物理學(xué)方法：遮斷空氣法（層積法）、 真空法增多、空氣置換法活動上、厭氧罐培養(yǎng)、厭氧袋法進一步推進、厭氧手套箱等導向作用。②化學(xué)方法：焦性沒(méi)食子酸法、硫乙醇酸鈉法應用的選擇、黃磷燃燒法十大行動。③生物學(xué)方法： 需氧菌共生法左右、燕麥發(fā)芽法。④混合法：真空或氣體置換與焦性沒(méi)食子酸法相結(jié)合綜合措施，可根據(jù)實(shí)際情況選用可靠保障。