液相色譜儀的液相色譜柱在使用一段時間后體驗區,會出現(xiàn)一定的常見故障增多,如果不能很好的判斷并解決就會影響色譜柱的使用效果,從而影響樣品的分析結(jié)果增幅最大。
液相色譜柱常見的幾種故障判斷及排除方法:
一共享應用、柱壓問題柱壓問題是使用液相色譜過程中需要密切注意的地方,柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰形的好壞標準、柱效示範推廣、分離效果及保留時間等密切相關(guān)。
1.1 壓力過高 這是液相在使用中zui常見的問題重要作用,指的是壓力突然升高持續向好,一般都是由于流路中有堵塞的原因。此時充足,我們應(yīng)該分段進(jìn)行檢查進展情況。
(1).首先斷開真空泵的入口處綠色化發展,此時PEEK管里充滿液體至關重要,使PEEK管低于溶劑瓶,看液體是否自由滴下用上了,如果液體不滴或緩慢滴下提升行動,則是溶劑過濾頭堵塞。
處理方法:用30%的硝酸浸泡半個小時關註,在用超純水沖洗干凈研究進展。如果液體自由滴下,溶劑過濾頭正常連日來,在檢查快速融入;
≌J為。?).打開Purge閥,使流動相不經(jīng)過柱子增強,如果壓力沒有明顯下降重要意義,則是過濾白頭堵塞。
處理方法:將過濾白頭取出更加廣闊,用10%的異丙醇超聲半個小時不斷完善。如果壓力降至100PSI (6.7 Bar)以下,過濾白頭正常方便,在檢查;
「黝I域。?).把色譜柱出口端取下應用領域,如果壓力不下降,則是柱子堵塞進行培訓。處理方法:如果是緩沖鹽堵塞發展機遇,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強(qiáng)保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞法治力量,則要用比現(xiàn)在流動相更強(qiáng)的流動相沖至壓力正常全技術方案。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進(jìn)出口反過來接在儀器上供給,用流動相沖洗柱子優勢與挑戰。這時,如果柱壓仍不下降解決方案,只有換柱子入口篩板趨勢,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降上高質量,所以盡量少用一站式服務。
1.2壓力過低壓力過低的現(xiàn)象一般是由于系統(tǒng)泄漏 處理方法:尋找各個接口處,特別是色譜柱兩端的接口深入交流,把泄漏的地方旋緊即可引領作用。當(dāng)然還有一個原因就是泵里進(jìn)了空氣,但此時表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn)臺上與臺下,忽高忽低用的舒心,更嚴(yán)重一點(diǎn)會導(dǎo)致泵無法吸上液體。處理方法:打開Purge閥品牌,用3——5ml/min的流速沖洗深入開展,如果不行,則要用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出等形式。
2漂移問題 主要包括基線漂移和保留時間漂移技術的開發。
2.1基線漂移 一般說來研究與應用,機(jī)器剛起動時,基線容易漂移更高效,大概要半個小時的平衡時間全面協議,如果你用了緩沖溶液或緩沖鹽,還有就是在低波長下(220nm)平衡時間相對會比較長具體而言,但如果你在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)基線漂移工具,則你要考慮下面的原因:
1.紫外燈能量不足。解決方法:更換新的紫外燈
2.柱溫波動喜愛。解決方法:控制好柱子和流動相的溫度重要的角色,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱。
3.流通池被污染或有氣體向好態勢。 解決方法:用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池(斷開柱子)平臺建設。如有需要,可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)貢獻力量。
4.流動相污染重要的作用、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成。解決方法:檢查流動相的組成去創新,使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑足夠的實力。
5、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)(高K’值)以饅頭峰樣被洗脫出結構,從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線更適合。解決方法:使用保護(hù)柱,如有必要溝通協調,在進(jìn)樣之間擴大公共數據。在分析過程中,定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子帶動擴大。
6核心技術體系、檢測器沒有設(shè)定在zui大吸收波長處。解決方法:將波長調(diào)整至zui大吸收波長處
7持續發展、流動相的PH值沒有調(diào)節(jié)好必然趨勢。解決方法:加適量的酸或堿調(diào)至*PH值
2.2保留時間漂移 保留時間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個重要標(biāo)志,同一種東西擴大,兩次的保留時間相差不要超過15s多樣性,超過了半分鐘可看做保留時間漂移,就無法進(jìn)行定性新格局,你要考慮以下原因:
1明顯、溫控不當(dāng)。解決方法:調(diào)好柱溫顯示,檢查是否有打開的窗戶或空調(diào)對著柱溫箱創新為先。
2真正做到、流動相比例變化。解決方法:檢查四元泵的比例閥是否有故障
3創新延展、色譜柱沒有平衡強化意識。解決方法:在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時間平衡色譜柱
4、流速變化基本情況。解決方法:重新設(shè)定流速
5現場、泵中有氣泡。解決方法:力量、從泵中除去氣泡
2.3 峰型異常問題 峰型問題是液相的主要問題我有所應,在做液相過程中,我們就是要變換不同的條件來改善不好的峰型高效流通,對于各種各樣的異常峰合規意識,要區(qū)別對待,從主要問題出發(fā)有效性,一個一個加以解決。
1機遇與挑戰、所有峰均為寬峰廣泛關註。解決方法:系統(tǒng)未達(dá)到平衡;溶解樣品的溶劑極性比流動相差很多集成技術;色譜柱尺寸及類型選擇不正確就能壓製;色譜柱或保護(hù)柱被污染或柱效降低;溫度變化造成的影響適應能力。 更優美、
2、所出峰比預(yù)想的小防控。解決方法:樣品黏度過大成效與經驗;進(jìn)樣品故障或進(jìn)樣體積誤差;檢測器設(shè)置不正確.定量環(huán)體積不正確堅實基礎;檢測池污染稍有不慎;檢測器燈出現(xiàn)問題。
3等地、色譜圖中未出峰最為顯著。解決方法:系統(tǒng)未進(jìn)樣或樣品分解;泵未輸液或流動相使用不正確規定;檢測器設(shè)置不正確環境;針對以上情況成因作相應(yīng)調(diào)整即可。
4高質量、 一個峰或幾個峰是負(fù)峰相對簡便。解決方法:流動相吸收本底高重要組成部分;進(jìn)樣過程中進(jìn)入空氣;樣品組分的吸收低于流動相趨勢。
5有力扭轉、 所有峰均為負(fù)峰。解決方法:信號電纜接反或檢測器輸出極性設(shè)置顛倒一站式服務;光學(xué)裝置尚未達(dá)到平衡廣度和深度。
6、出現(xiàn)雙峰或肩峰智能化。解決方法:進(jìn)樣量過大科技實力;樣品濃度過高;保護(hù)柱或色譜柱柱頭堵塞建設;保護(hù)拄或色譜柱污染或失效在此基礎上;柱塌陷或形成短通道。
7前來體驗、前伸峰自主研發。解決方法:進(jìn)樣量或樣品濃度高;溶解樣品的溶劑較流動
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